支原体是实验室中常见的细胞污染源,属于原核生物,其污染主要来源于细胞、毒种、血清、鸡胚、原代细胞等动物性原料,以及操作人员。数据显示,约有15%-35%的细胞存在支原体污染。支原体会显著改变宿主细胞的结构与功能,导致实验结果不准确;同时干扰细胞代谢与生长,改变核酸合成,影响细胞抗原性,造成染色体的改变,并干扰病毒的复制与作用。因此,检测和去除支原体污染对于细胞培养至关重要。可以说,确保细胞的健康生长,去除支原体污染是必不可少的。
消除细胞中的支原体污染,首先面临的挑战是如何有效检测可能存在的支原体。支原体是一种无细胞壁、直径约为0.1-0.3微米的原核微生物,常规的革兰氏染色法对其无效,难以通过光学显微镜观察。此外,一些支原体(如口腔支原体)可以与宿主细胞建立潜伏感染,未引起明显的细胞病变,导致其不易被察觉。
经典的支原体检测方法包括培养法和指示细胞法,但这两种方法耗时较长,且培养条件相对严格,过程中容易受到污染,从而影响检测结果的准确性。随着生命科学的进步,现已出现一些更高效且准确的方法来替代传统方法。《欧洲药典》中提到,经过适当验证的核酸扩增技术(NAT)可以代替培养法和指示细胞法。NAT法具有高灵敏度,且检测时间较短。基于支原体特异性激酶的生化检测法,更是可以在20-30分钟内完成检测,灵敏度接近NAT法,尤其适合快速判断支原体污染。
在支原体检测方法中的时间及灵敏度对比表中,我们可以看到:
- 培养法需要28天,灵敏度为10 cfu/mL
- 指示细胞法耗时4-5天,灵敏度为100 cfu/mL
- NAT法仅需2-5小时,灵敏度达10 cfu/mL
- 生化法可以在20分钟内完成,灵敏度为50 cfu/mL
对于支原体的快速检测,[尊龙凯时]推出了两款基于NAT和激酶生化检测技术的快速检测产品,这些产品能够在半小时内完成检测,灵敏度高达10 cfu/mL,有助于快速排查支原体污染。
具体产品包括:
- ABS90062一步法快速支原体检测试剂盒(等温扩增法):使用等温扩增技术与可视化颜色变化,可在30分钟内检测细胞培养液中的8种常见支原体,无需专用仪器。
- ABS90283 MYCO-LTM荧光素酶支原体检测试剂盒:能够特异性检测活支原体,灵敏度接近NAT法,检测时间同样为30分钟。
除了检测试剂,[尊龙凯时]还提供了一整套支原体预防及清除的试剂,以帮助实验室远离支原体的困扰。这包括多肽类清除剂、天然抗生素等。同时,定期检测与环境管控也是有效防范支原体污染的关键,通过专业的检测产品与标准化操作流程,可以有效构建细胞培养的支原体防护屏障,保障科研实验的稳定与可靠性。
总之,支原体污染防控需要贯穿于“检测-清除-预防”的全过程。定期检测、及时处理污染、以及环境管控是确保细胞培养质量的三大要素。通过采用[尊龙凯时]的高品质产品,可以提升细胞培养的整体安全性与可靠性。